定氮仪等三款仪器对于蛋白质测定分析

    食品中蛋白质含量测定方法多有报导，如凯氏定氮仪法、酚试剂法、双缩尿法、光度法、甲醛滴定法和电流法等，但都存在着操作繁琐、费时等不足，而且文献报道基本是采用进口仪器，不适合一般实验室使用。经典的凯氏定氮仪法是在食品分析、营养和生化研究中广泛应用的方法，但操作也较为繁琐，耗时较长，作为本科学生实验无法在规定的时间内完成整个测定过程；同时大量试剂消耗造成资源浪费。
      本文利用控温消解炉同时可以消解多个样品，利用定氮仪自动完成加碱、定量蒸馏吸收。自动电位滴定仪具有准确度高和自动化程度高的特点。本文测定粮食中蛋白质的含量，对消解条件进行了摸索，并与国标法进行了比对。试剂：K2S04；CuS04•5H2O；H2S04；H3B03；NaOH（试剂均为分析纯）。精称0.1～0.5g粮食样品于干燥的消解管中，加入0.3gCuS04•5H20、1.0gK2S04和5mLHzS04摇匀，加热，消解；待反应液呈蓝绿色澄清透明后，继续加热10min后取下冷却至室温。将上述消解管直接卡于凯氏定氮仪，将装有20mL硼酸溶液的锥形瓶置于凯氏定氮仪吸收架，加碱至液体呈棕褐色，蒸馏至凯氏定氮仪发出信号后，取下锥形瓶，并置于全自动电位滴定仪，用硫酸标准溶液滴定，按上述方法考察试剂空白。按照GB／T5009．5-2003方法进行测定Ⅲ。
      实验考察了样品量与消化剂用量对测定结果的影响，当样品量为0．1～0．5g时；CuSO4、K2SO4和H2SO4试剂用量分别为0.39、1.0g和5mL时消解效果zui为理想，消解速度快，吸收及电位滴定效果较好，其测定值符合要求。当样品量过大时，则消解、吸收、滴定效果均不理想。设置不同的消解时间，测定样品的蛋白质含量。加热10min的测定值与国标法测定值接近。取蛋白质含量不同的4种样品，分别加标（硫酸铵）回收率实验，硫酸氨的回收率均在99.0％以上。采用本法与国标定氮法分别测定4种样品蛋白质含量。结果表明，两种方法无显着性差异（P=0.95）时，量值<2.30，符合要求。取蛋白质含量不同的4种样品，平行测定5次，相对平均偏差（RSD）均小于1.0％，表明该法的精密度良好。
      本方法利用三种仪器测量食品中蛋白质的含量，具有较高的准确度和精密度，操作简便、快速、省时、省力，设备价格低，易于推广，且试剂用量少，降低实验成本，同时也减少了对环境的污染，这不仅能使本科学生在规定时间内完成整个实验过程，还可以让学生在一般基础实验室学到、用到较先进的仪器。